Analizy mikroskopowe

Print Friendly

Analizy mikroskopowe

Preparatyka próbek

  • Przygotowanie in situ ultra cienkich skrawków o grubości poniżej 30 nm do obrazowania transmisyjną mikroskopią elektronową (TEM), przy użyciu skupionej wiązki jonów i mikromanipulatora
  • Witryfikacja wysokociśnieniowa (high pressure freezing) oraz przepajanie prób w temperaturze ujemnej (freeze-substitution)
  • Krojenie bloczków na ultramikrotomie – przygotowywanie skrawków do TEM
  • Suszenie prób w punkcie krytycznym do skaningowej mikroskopii elektronowej (SEM)

Zobacz także: Laboratorium Mikroskopii Elektronowej BIO

Analizy przy użyciu mikroskopii elektronowej

  • Obrazowanie przy użyciu SEM z emisją polową, przy max. rozdzielczości 0,8 nm
  • Obrazowanie przy użyciu mikroskopii skanigowo-transmisyjnej STEM (powiększenie do 2 mln razy, do 12 preparatów na serię)
  • Obrazowanie materiału biologicznego natywnego przy użyciu wysokoczułego energetyczno-selektywnego detektora elektronów wtórnie rozproszonych ESB w warunkach normalnych i Cryo
  • Kontrast kompozycji materiałowej w skali Nano
  • Praca przy napięciach poniżej 1,5 kV, umożliwiająca bramkowanie energii wzbudzania
  • Trawienie prób przy użyciu skupionej wiązki jonów (focused ion beam) jednorazowe oraz seryjne przy jednoczesnym obrazowaniu SEM do tworzenia rekonstrukcji 3D, max. rozdzielczość Z ~10nm.
  • Analiza składu pierwiastkowego i rozmieszczenia pierwiastków w próbach z użyciem EDX w warunkach cryo i normalnych (do 30 kV napięcia)
  • Analiza i interpretacja mikrografii obiektów biologicznych
  • Mikroskopia korelacyjna świetlno-elektronowa (CLEM) hodowli komórkowych przy współpracy z Laboratorium Mikroskopii Konfokalnej

Zobacz także: Laboratorium Mikroskopii Elektronowej BIO

Analizy metodami mikroskopii świetlnej (mikroskopia szerokiego pola i konfokalna)

  • Analiza jakościowa i ilościowa wybarwionych preparatów komórkowych i tkankowych o grubości do 0,2 mm:
    • Morfologia i dystrybucja komórek
    • Dystrybucja organelli wewnątrzkomórkowych
    • Kolokalizacja białek
    • Cytoszkielet
  • Analiza przyżyciowa in vitro preparatów komórkowych i tkankowych w hodowli w kontrolowanych warunkach środowiska (temperatura, O2, CO2)
    • Morfologia i ruchliwość komórek
    • Dynamika struktur wewnątrzkomórkowych
    • Testy funkcjonalne na komórkach (produkcja wolnych rodników, fagocytoza, zmiany cytoszkieletu, badania internalizacji przeciwciał do wnętrza komórek)
  • Analiza przyżyciowa in vivo dystrybucji i ruchliwości komórek w czasie rzeczywistym w modelu mysim
  • Wizualizacja 3D wybarwionych preparatów
  • Wysokoprzepustowe testy przesiewowe (HTS – high throughput screening)
  • Analiza obrazów mikroskopowych
  • Eksperymenty techniką FRAP (fluorescence recovery after photobleaching)

Zobacz także: Laboratorium Mikroskopii Konfokalnej

Autor: Agata Kołacz, Opublikowano: 13.05.2016
plusfontminusfontreloadfont